番茄无选择标记转化体系的研究
邹芳玲，国艳梅，杜永臣，祝光涛，高建昌，胡鸿*
中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081
Studies on Tomato Marker-free Transformation System
ZOU Fang-ling，GUO Yan-mei，DU Yong-chen，ZHU Guang-tao，GAO Jian-c hang，HU Hong*
Institute of Vegetables and Flowers， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China
摘要 以含多毛番茄GGPS 基因的表达载体pBI121-GGPS 和无标记载体pBINMF-GUS 为基础，利用载体pBINMF-GUS 的T-DNA 区无选择标记基因的特点，将目的基因GGPS 连接于pBINMF-GUS 的T-DNA 中，用农杆菌菌株EHA105、C58 介导转化番茄品种中蔬6 号，利用PCR 直接筛选转化体。结果表明：MS+1.0 mg·L-1 ZT+0.5 mg·L-1 IAA 为子叶最佳芽诱导培养基，农杆菌菌株EHA105 更利于中蔬6号的转化，获得阳性植株4 株，转化率为3.6%。PCR 及RT-PCR 检测结果表明：目的基因已整合到中蔬6 号基因组中，且在转录水平上得到表达。
关键词 ：
番茄 ,
根癌农杆菌 ,
无选择标记 ,
遗传转化
Abstract ：In this paper，the aimed gene GGPS was cut from the binary plant expression vector pBI121-GGPS and ligated to the marker-free vector pBINMF-GUS，so a new marker-free vector was formed，in which T-DNA segment only harboured GGPS gene and a GUS gene. This vector was successfully transferred into tomato（Lycopersicum esculentum Mill. ） cultivar‘ Zhongshu No. 6’ via Agrobacterium-mediated transformation used strains EHA105 and C58. The results showed that MS+1.0 mg·L-1 ZT+0.5 mg·L-1 IAA was the best shooting medium for‘ Zhongshu No. 6’. The transformation rate of strain EHA105 was 3.6%，which was better than the rate of strain C58. The results of PCR analysis indicated that GGPS gene was integrated into the genome of‘Zhongshu No. 6’. RT-PCR detection indicated that GGPS gene was expressed at RNA level.
Key words ：
Tomato
Agrobacterium tumefaciens Marker-free
Genetic transformation
收稿日期: 2013-01-16
出版日期: 2013-03-15
基金资助: 国家自然科学基金项目（30900988/C110502），农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室资助项目
通讯作者:
胡鸿，女，研究员，硕士生导师，主要从事蔬菜贮藏保鲜与采后处理技术方面的研究以及科研管理工作，E-mail：huhong@caas.cn
作者简介 : 邹芳玲，女，硕士研究生，主要从事蔬菜遗传育种方面的研究，E-mail：zflnxyc@126.com
引用本文:
邹芳玲, 国艳梅, 杜永臣, 祝光涛, 高建昌, 胡鸿. 番茄无选择标记转化体系的研究[J]. 中国蔬菜, 2013, 1(8): 19-25.
ZOU Fang-Ling, GUO Yan-Mei, DU Yong-Chen, ZHU Guang-Tao, GAO Jian-Chang, HU Hong. Studies on Tomato Marker-free Transformation System. , 2013, 1(8): 19-25.
链接本文:
https://www.cnveg.org/CN/ 或 https://www.cnveg.org/CN/Y2013/V1/I8/19
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